Диски Полимиксин В (300 Ед) используются для тестирования чувствительности к противомикробным препаратам бактериальных культур.
Состав
Ингридиенты |
Концентрация (-ии) |
Полимиксин В |
300 Ед |
Внешний вид
Диск фильтровальной бумаги диаметром 6 мм с надписью «РВ 300» в центре диска с обеих сторон каждого диска.
Хранение
Диски должны храниться в диапазоне температур от -20ᵒ до +8ᵒ С в сухих условиях, вместе с мешком адсорбента в каждой упаковке.
Инструкции по использованию
· Приготовьте стерильные чашки Петри со средой Агар Мюллера-Хинтона (TM 339) для быстро растущих аэробных организмов в соответствии с инструкцией для пользователя. Среда должна быть стерильной и иметь глубину агара 4,0 ± 0,5 мм.
· Привить чашки в сравнительной мутности со стандартом 0,5 Макфарланда техникой газона. В качестве альтернативы, прививочный материал может быть стандартизирован другим соответствующим оптическим методом (0,08 - 0,13 ОП мутной суспензии при 625 нм).
· Дайте прививочному материалу высохнуть в течение 5 - 15 минут с крышкой на месте.
· Применить диски с антибиотиками в асептических условиях, с использованием стерильного аппликатора или щипцов.
· Поместите противомикробные диски с центрами не менее 24 мм друг от друга. Для прихотливых организмов и для Пенициллинов и Цефалоспоринов, диски предпочтительно должны быть размещены с центрами в 30 мм друг от друга.
· Немедленно начните инкубацию при температуре 35 ± 2 ° С и исследуйте после 16-20 часов или дольше, если это необходимо. Для привередливых организмов инкубируйте при соответствующей температуре и времени.
· Измерьте зону ингибирования и запишите диаметры зон с точностью до миллиметра с помощью откалиброванного прибора.
Принцип действия:
Испытания антимикробной чувствительности (ИАЧ) бактерий и дрожжей является простой и важной техникой в большинстве клинических лабораторий.Результаты этих испытаний являются основой отбора наиболее подходящего противомикробного средства для лечения против инфекции. До 1950-х годов, в клинических лабораториях, отсутствовали методики для точного определения invitro реакции организмов к антимикробным препаратам. На основе метода Бауэра-Кирби, стандартизованные справочные процедуры для дисковых систем были опубликованы ВОЗ и FDA и периодически обновляются CLSI (ранее NCCLS).
Институт Клинических Лабораторных Стандартов (CLSI) и Европейский комитет по тестированию антимикробной восприимчивости (EUCAST) опубликовали исчерпывающие документы, касающиеся систем диффузионных дисков. На сегодняшний день, тест агар-диффузионный диск является удобным и широко используемым методом для повседневной антимикробной чувствительности.
Однако некоторые меры предосторожности должны поддерживаться при обращении с Чувствительными дисками,
1. При получении диски должны немедленно храниться при рекомендуемой температуре.
2. Подготовка среды, подготовка инокулята и инкубирование должно быть сделано, по инструкциям.
Интерпретация
Используйте следующие критерии интерпретации для категоризации чувствительности.
Антимикробный агент |
Интерпретационные критерии для |
Чувствительность в мм или более |
Среднее значение |
Резистентность мм или менее |
Полимиксин-В 300 Ед |
P. aeruginosa |
12 |
- |
11 |
Микробиологические параметры
Культурные характеристики, наблюдаемые после инокуляции чашки с использованием свежего прививочного материала мутности, сопоставимой со стандартом 0,5 McFarland (1-2 х 108 КОЕ / мл) с помощью техники газоном, распределяя диски с антибиотиком и инкубировании при температуре 35 ± 1 ° C в течение 16 - 20 часов. После инкубации, диаметр зоны ингибирования измеряется в мм.
Тест штаммы |
Код американского банка типовых культур |
Стандартная зона ингибирования |
Escherichia coli |
25922 |
13 – 19 |
Pseudomonas aeruginosa |
27853 |
14 – 18 |
Меры предосторожности:
· Посевной материал оптимально следует использовать в течение 15 и всегда в течение 60 мин подготовки для обеспечения правильного количества жизнеспособных клеток.
· Во время прививки, запрещают использование загрязненные чашки.
· Диски должны быть применены в течение 15 мин прививки и начать инкубацию в течение следующих 15 минут.
· Не превышать инкубационный период 16-20 ч, так как длительной инкубации часто приводит к нечетким зонам ингибирования или колониям в пределах зон ингибирования, которые могут дать ложные результаты.
· Максимум шесть дисков могут быть размещены на круглой чашке диаметром 90-мм и 12 на чашках диаметром 150 мм.
© 2012 - 2024 glotr.uz. Все права защищены