SIMMONS CITRATE AGAR (100 gr.) / Цитратный агар Симмонса (100 гр.)

ЦИТРАТНЫЙ АГАР СИММОНСА

Для дифференциации грамм отрицательных бактерий по способности утилизации цитрата

 Состав

* Обезвоженный порошок, гигроскопичен, хранить в сухом месте, в плотно закрытой таре при температуре ниже 25 ° C, защищать от прямых солнечных лучей.

Инструкции по использованию

Растворить 24,28 г в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно нагреть до кипения при перемешивании чтоб растворить среду полностью. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121 ° С) в течение 15 минут. Охладить до температуры 50° С и разлить в стерильные чашки Петри или в пробирки.

Внешний вид: прозрачный или слегка опалесцирующий гель, лесного-зеленого цвета

рН (при 25 ° С): 6,9 ± 0,2

  Принцип действия:

Цитратный агар Симмонса используется для дифференциации грамотрицательных бактерий по способности утилизации цитрата. Цитрат действует как источник углерода и азота в среде. Аммоний дигидрофосфат фосфат обеспечивает присутствие азота в среде. Дикалийфосфат выступает в качестве буфера. Хлористый натрий поддерживает осмотическое равновесие среды. Цитрат натрия является единственным источником углерода в этой среде. Сульфат магния является кофактором для метаболического процесса. Организмы, которые могут использовать аммоний дигидрофосфат натрия и цитрат в качестве единственного источника азота и углерода будут расти на этой среде и осуществлять изменение цвета от зеленого (нейтрального) до синего (щелочного). Агар является затвердевающим агентом. Щелочная реакция происходит, когда генерируется избыток CO₂ (цикл Кребса), по мере расщепления расщепления цитрата с образованием оксалоацетата. Оксалоацетат декарбоксилируется в пировиноградную кислоту и СО₂. Избыток СО₂ в сочетании с натрием и водой, которая уже присутствует в среде с образованием карбоната натрия. Кроме того, бактерии, которые используют цитрат могут извлекать азот из фосфата аммония, присутствующего в среде, образуя аммиак, который соединяется с водой с образованием NH₄OH. Образование этих конечных продуктов производят щелочной рН в среде (более 7,6), что приводит к изменению цвета, который детектируется Бромтимоловым синим. Изменение цвета от зеленого до синего является показателем положительной реакции.

Интерпретация результатов

Культуральные свойства, наблюдались после инокуляции (50-100 КОЕ / мл) и инкубации при 35-37ᵒС в течении 18-24 часов.