ЖИДКАЯ ТИОГЛИКОЛЕВАЯ СРЕДА
Для тестирования стерильности биологических образцов и для выращивания анаэробных, аэробных и микроаэрофильных организмов
Состав
Ингредиенты |
г/л |
Панкреатический перевар казеина |
15,00 |
Глюкоза (Анг-д) |
5,50 |
Дрожжевой экстракт |
5,00 |
Хлорид натрия |
2,50 |
L- цистин |
0,50 |
Тиогликолят натрия |
0,50 |
Резазурин |
0,001 |
Агар |
0,750 |
* Обезвоженный порошок, гигроскопичен, хранить в сухом месте, в плотно закрытой таре при температуре ниже 25 ° C, защищать от прямых солнечных лучей.
Инструкции по использованию
Растворить 29,75 г в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно нагреть до кипения при легком перемешивании и растворить среду полностью. Разлить в пробирки в объеме 15 до 18 мл. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121 ° С) в течение 15 минут. Охладить и хранить вдали от света. Резазурин является показателем окисления-восстановления и когда происходит окисление вызывает превращение всей среды в розовый цвет. Пробирки могут быть восстановлены до надлежащего состояния путем нагревания питательной среды до 100 ° С в ванне с кипящей водой. Перед нагреванием, слегка ослабить крышку и затянуть во время охлаждения до комнатной температуры.
Примечание: Если верхняя часть среды больше чем треть пробирки приобрела розовую окраску, среда может быть восстановлена один раз при нагревании на водяной бане или в свободной струе пара до тех пор, пока розовый цвет не исчезнет.
Внешний вид: Светло-желтый, слегка опалесцирующий раствор
рН (при 25 ° С): 7,1 ± 0,2
Принцип действия:
ЖИДКАЯ ТИОГЛИКОЛЕВАЯ СРЕДА используется для тестирования стерильности биологического материала и для выращивания анаэробных и микроаэрофильных организмов. "Брювер" (“Brewer”) сформулировал эту среду и она рекомендуется USP (Фармакопея Соединенных Штатов). Среда также используется для тестирования стерильности антибиотиков, биологических и пищевых продуктов, а также для определения коэффициента фенола и спороцидные способности дезинфицирующих средств. Тем не менее, она предназначена для исследования прозрачной жидкости или растворимых в воде материалов. Жидкая тиогликолевая среда также обычно используется для проверки стерильности складируемой крови в банках крови. Среда содержит панкреатический перевар казеина и дрожжевой экстракт, которые обеспечивают азотом и усилителями существенного роста, необходимых для размножения бактерий. Тиогликолят натрия и L-цистин выступает в качестве восстанавливающего агента, который поддерживает низкое парциальное давление кислорода путем удаления молекулярного кислорода из окружающей среды. Индикатор резазурин распределен по всей среде заставляя среду окрашиваться в розовый цвет в окисленном состоянии. Глюкоза является ферментируемым источником энергии. Добавление небольшого количества агара помогает в поддержании низкого окислительно-восстановительного потенциала для стабилизации среды. Добавление агара в небольшом количестве способствует росту аэробов, а также анаэробов, что замедляет дисперсию CO2, диффузию кислорода и восстанавливающих веществ. При инкубации при 30 – 35 ᵒС в течение 48 - 72 часов, проявляется пышный рост всех тестируемых культур штаммов. Хлористый натрий
помогает поддерживать равновесие осмотического давления.
Интерпретация результатов
Культуральные свойства, наблюдались после инокуляции (10 – 100 КОЕ / мл) в каждой пробирке. Для инкубации:
(I) Держать бактериальные культуры пробирки с разрыхленными крышками при температуре 30 - 35 ° С в течение 48 - 72 часов
(II) Хранить пробирки грибов и дрожжей с разрыхленными крышками при температуре 20 - 25 ° C в течение 2 - 7 дней
(III) Хранить пробирки *Bacteroides fragilis и * Staphylococcus aureus с затянутыми крышками при температуре 30 - 35 ° C в течение 48 - 72 часов.
Тест штаммы |
Код Американского банка типовых культур |
Инокулят (КОЕ / мл) |
Рост (мутность) |
Bacillus subtilis |
6633 |
10-100 |
Хороший, мутный раствор |
*Bacteroides fragilis |
23745 |
10-100 |
Хороший, мутный раствор |
*Staphylococcus aureus |
25923 |
10-100 |
Хороший, мутный раствор |
Clostridium sporogenes |
19404 |
10-100 |
Хороший, мутный раствор |
Candida albicans |
10231 |
10-100 |
Хороший, мутный раствор |
Pseudomonas aeruginosa |
9027 |
10-100 |
Хороший, мутный раствор |
© 2012 - 2024 glotr.uz. Все права защищены