СОЕВЫЙ БУЛЬОН РАППАПОРТА ВАСИЛМАДИСА (RVS БУЛЬОН)
Для селективного обогащения Salmonellae
Состав
Ингредиенты |
г / л. |
Хлорид магния (ангидрид) |
13,58 |
Хлорид натрия |
7,20 |
Соевый пептон |
4,50 |
Дигидрофосфат калия |
1,26 |
Гидрофосфат натрия |
0,18 |
Малахитовый зеленый |
0,036 |
* Обезвоженный порошок, гигроскопичен, хранить в сухом месте, в плотно закрытой таре при температуре ниже 25 ° C и защищать от прямых солнечных лучей.
Инструкции по использованию
Растворить 26,75 г продукта в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно нагреть до кипения при легком перемешивании и растворить среду полностью. Разлить по 10 мл в стеклянные пробирки с плотно закрывающимися колпачками. Стерилизовать автоклавированием при 115°С в течении 15 минут. Охладить до температуры 25 ᵒС.
Внешний вид: темно-бирюзовый, прозрачный, может иметь светлый осадок..
рН (при 25 ° С): 5,2 ± 0,2
Принцип действия:
СОЕВЫЙ БУЛЬОН РАППАПОРТА ВАСИЛИАДИСА используют для селективного обогащения Salmonellae. Состав среды был разработан «Раппапортом» (“Rappaport”) после наблюдения, что сальмонеллы, более устойчивы к гипертоническим средам, чем большинство других энтеробактерий. В своих опытах, Раппапорт показал, что хлорид магния является наиболее эффективным из всех испытанных солей. И наконец, ван Сшотхорст (van Schothorst) и Рено (Renaud) модифицировали Бульон Рапапорта Василиадиса путем замены казеинового пептона на пептон соевый как источник углерода и азота для общих требований к росту. Включив дигидрофосфатный буфер калия в формулу, было достигнуто большая стабильность среды с течением времени. Селективность среды еще дополнительно увеличивается путем добавления малахитового зеленого. Малахитовый зеленый подавляет рост других организмов, кроме сальмонелл. Низкий уровень рН среды, в сочетании с наличием малахитового зеленого и хлорида магния, селектирует высокорезистентные виды сальмонелл.
Метод: - Передача 0,1 мл посевного материала в пробирку 10 мл приготовленной среды (соблюдать соотношение 1: 100). Посевной материал, как правило, представляет собой предварительно обогащенную среду: Забуфференная Пептонная Вода (ТМ 307) – проводят инкубацию при 35 °С в течение 16 - 20 часов. Проводят изоляцию в нескольких селективных средах для видов Salmonella, платиновой петлей. Посеять 0,1 мл предварительно обогащенного в Забуфференной Пептонной Воде в 10 мл соевого бульона Раппопорта - Василиадиса и инкубировать при температуре 41,5 ± 0,5 °С в течение 21 - 27 часов. Субкультура на подтверждающей среде, включающую, XLD Агар при температуре 35 ± 2 °С. Изучить рост после 18-24 ч инкубации.
Интерпретация результатов
Культурные характеристики, наблюдались после инокуляции (103 КОЕ / мл), при инкубации при 41,5 ᵒС в течение 24 часов
Микроорганизмы |
Код американского банка типовых культур |
Прививочный материал (КОЕ) |
На XLD Агаре |
Salmonella typhimurium |
14028 |
Рост, красные колонии с центром черного цвета |
|
Salmonella arizonae |
13314 |
103 |
Рост, красные колонии с центром черного цвета |
Pseudomonas aeruginosa |
27853 |
103 |
Слабый рост, красные колонии |
Escherichia coli |
25922 |
103 |
Слабые и подавленные, желтые колонии |
© 2012 - 2024 glotr.uz. Barcha huquqlar himoyalangan.